?? 基礎(chǔ)信息
貨號(hào):TB1804R01
品名: Neuronal Activity Tissue Clearing Kit
品牌: Translucence Biosystems
??原理
該試劑盒的核心原理是基于檢測(cè)神經(jīng)元激活后表達(dá)的即早基因(IEGs) 產(chǎn)物, specifically Npas4 and cFos。
1. 神經(jīng)元活動(dòng)標(biāo)記: 當(dāng)神經(jīng)元被激活時(shí),會(huì)迅速表達(dá)cFos和Npas4等即早基因。因此,這些蛋白的表達(dá)可以作為神經(jīng)元近期活動(dòng)的標(biāo)志。
2. 雙重標(biāo)記,提高特異性:
●cFos:是一種廣泛使用的神經(jīng)元活動(dòng)標(biāo)志物,但其表達(dá)也可能由cAMP升高、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等其他信號(hào)通路引發(fā),特異性相對(duì)較低。
●Npas4:其表達(dá)由神經(jīng)元活動(dòng)下游的Ca2+依賴信號(hào)通路精確調(diào)控,作為純神經(jīng)元活動(dòng)的標(biāo)志物特異性更高。
3. 組織透明化: 試劑盒采用基于iDISCO+的改良透明化 protocol,通過(guò)一系列化學(xué)處理去除脂質(zhì)等光散射物質(zhì),使整個(gè)大腦組織變得透明,從而允許光穿透整個(gè)樣本。
4. 免疫熒光染色: 試劑盒內(nèi)含經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的抗Npas4抗體和抗cFos抗體,以及相應(yīng)的熒光標(biāo)記二抗(Npas4-568呈紅色,cFos-647應(yīng)呈遠(yuǎn)紅色,圖示中可能做了顏色調(diào)整)。通過(guò)免疫熒光染色,在透明的全腦樣本上對(duì)這兩種活動(dòng)標(biāo)志物進(jìn)行標(biāo)記。
5. 成像與量化: 使用顯微鏡(如光片熒光顯微鏡)對(duì)透明的全腦進(jìn)行三維成像,可以在單細(xì)胞分辨率下獲得整個(gè)大腦中所有被激活神經(jīng)元的分布圖。通過(guò)同時(shí)觀察cFos和Npas4的表達(dá)模式(共表達(dá)或獨(dú)立表達(dá)),可以更全面、特異地區(qū)分神經(jīng)元活動(dòng)和其他信號(hào)機(jī)制。
?解決實(shí)驗(yàn)中哪些問(wèn)題
1. 傳統(tǒng)二維切片的局限性: 解決了傳統(tǒng)石蠟/冰凍切片只能觀察大腦極少數(shù)切面,無(wú)法獲得全腦范圍活動(dòng)圖譜的問(wèn)題,避免了采樣誤差。
2. 神經(jīng)元活動(dòng)標(biāo)志物的特異性問(wèn)題: 通過(guò)同時(shí)檢測(cè)Npas4和cFos,幫助研究人員更準(zhǔn)確地區(qū)分真實(shí)的神經(jīng)元活動(dòng)和其他非特異性信號(hào)激活,提高結(jié)論的可靠性。
3. 全腦三維成像的技術(shù)門檻: 提供了一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化、用戶友好的完整解決方案(從透明化、染色到成像方案),降低了實(shí)現(xiàn)全腦透明化成像的技術(shù)難度和設(shè)備要求,使更多實(shí)驗(yàn)室能夠開展此類研究。
4. 大數(shù)據(jù)分析的挑戰(zhàn): 提供(折扣價(jià)的)AI驅(qū)動(dòng)的三維量化服務(wù),幫助用戶處理全腦成像產(chǎn)生的海量數(shù)據(jù)(TB級(jí)),自動(dòng)識(shí)別和計(jì)數(shù)被激活的細(xì)胞。
??優(yōu)勢(shì)
1. 全面且特異: 同時(shí)檢測(cè)兩種互補(bǔ)的即早基因,提供更全面的神經(jīng)元活動(dòng)信息。
2. 高分辨率: 實(shí)現(xiàn)全腦范圍的細(xì)胞分辨率成像,不漏掉任何一個(gè)被激活的細(xì)胞。
3. 即用型試劑盒: 包含所有必要的緩沖液、抗體和耗材,可處理5個(gè)小鼠全腦。
4. 用戶友好: 無(wú)需豐富的經(jīng)驗(yàn)或特殊的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,按照提供的標(biāo)準(zhǔn)化流程即可獲得高質(zhì)量結(jié)果。
5. 流程清晰: 提供詳細(xì)的Protocol日歷,明確每個(gè)步驟所需時(shí)間,便于研究者規(guī)劃和跟蹤實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
6. 強(qiáng)大的支持 ecosystem: 除了產(chǎn)品,還提供配套的成像、數(shù)據(jù)分析(AI量化)和科學(xué)家支持等一站式服務(wù)。
??客戶群體
該產(chǎn)品主要面向神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域的科學(xué)家和研究人員,特別是:
●研究大腦功能環(huán)路(神經(jīng)環(huán)路)的實(shí)驗(yàn)室。
●從事行為學(xué)(如學(xué)習(xí)記憶、恐懼、成癮)、藥理學(xué)(藥物對(duì)全腦活動(dòng)的影響)或遺傳學(xué)(如特定基因敲除對(duì)腦功能的影響)研究的團(tuán)隊(duì)。
●希望從傳統(tǒng)二維切片分析升級(jí)到更全面的三維全腦分析的研究人員。
●需要高通量、可重復(fù)地繪制全腦神經(jīng)元活動(dòng)圖譜的實(shí)驗(yàn)室。
?? 訂貨信息
●產(chǎn)品內(nèi)容: 試劑盒包含處理5個(gè)小鼠全腦所需的所有試劑、抗體和耗材。
●訂購(gòu)方式: 上海起發(fā)
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